Получение культуры кератиноцитов для реконструкции in vitro эпидермиса человека
Вы здесь
Авторы статьи, не зарегистрировавшиеся:
И.И. Ильюкова
Аннотация:
В работе представлены результаты экспериментального получения культуры кератиноцитов из человеческой кожи с последующим подбором условий культивирования для разработки реконструированного эпидермиса. Проведены исследования, в результате которых подобраны оптимальные условия пробоподготовки кожи и ферментативного разделения дермальных фибробластов и эпидермального слоя, состоящего из кератиноцитов и меланоцитов.
Ключевые слова:
реконструированный эпидермис, культура кератиноцитов, клеточная 3D-модель
обновлено: 4.06.2023
Комментарии - 6
Добрый день, уважаемые авторы! Спасибо за интересную работу. Скажите, пожалуйста, принимая во внимание фактическую стоимость и необходимые трудозатраты, каковы реальные перспективы широкого использования культуры кератиноцитов для реконструкции эпидермиса человека?
Приветствуем Вас, уважаемая Анна Алексеевна, и благодарим за внимание к нашим исследованиям!
Отвечая на Ваш вопрос, в последние годы разработка альтернативных испытательных систем in vitro имеет особую актуальность в связи с постепенным отказом от экспериментов на лабораторных животных. Однако необходимо отметить, что применение тест-модели на основе реконструированного эпидермиса человека все же имеет некоторые ограничения для широкого использования, связанные с наличием необходимых компетенций у персонала, достаточно большими материальными и временными затратами, в сравнении с классическими исследованиями на животных .
Глубокоуважаемые коллеги! Спасибо за интересное сообщение. В материалах и методах (презентация) отмечается, что пролиферативная активность полученной культуры кератиноцитов Вами оценивалась цитофлуориметрически через 48 часов культивирования. В таблице результатов Вами указаны варианты оценки жизнеспособности клеток и их пролиферативной активности с иными режимами экспозиции - 8-15 часов. Вопрос:с чем связаны расхождения в представленных данных? Спасибо!
Приветствуем Вас, глубокоуважаемый Олег Владимирович, и благодарим за внимание к нашим исследованиям!
Отвечая на Ваш вопрос, указанное в докладе время экспозиции 8-15 часов относится к этапу ферментирования биоптатов кожи, при котором происходит выделение культуры кератиноцитов. Далее, через 48 часов культивирования производится оценка жизнеспособности и пролиферативной активности клеток.
Уважаемые авторы, благодарю за интересную статью, скажите каким образом в Вашем методе может быть предусмотрен этап контроля клеток на предмет патологических изменений, например, в силу не диагностированного у донора биологического материала не инфекционных болезней?
Приветствуем Вас, уважаемая Анна Михайловна, и благодарим за внимание к нашим исследованиям!
Отвечая на Ваш вопрос, согласно протоколу OECD Test No. 439 «In Vitro Skin Irritation: Reconstructed Human Epidermis Test Method» разрабатываемые тест-модели на основе реконструированного эпидермиса человека должны быть стандартизованы, что включает в себя контроль качества полученных клеток. Стандартизация модели является одним из дальнейших этапов нашей работы.